介绍一下环氧乙烷灭菌的操作流程

环氧乙烷（EO）灭菌是一种高效的低温灭菌方法，广泛应用于医疗用品（如一次性隔离衣、注射器、导管等）的灭菌处理，其核心是利用环氧乙烷的烷基化作用破坏微生物的 DNA 和蛋白质，达到灭菌效果。以下是环氧乙烷灭菌的详细操作流程，需在符合 GMP 标准的专用灭菌车间内进行：

一、灭菌前准备

1. 待灭菌物品预处理

• 物品检查：确认待灭菌物品（如隔离衣、医疗器械）已完成初检，无破损、污渍，且包装材料为 EO 穿透性良好的透气材料（如透析纸、复合无纺布袋），避免使用铝箔等阻隔性材料（影响 EO 气体渗透）。

• 装载要求：

• 将物品整齐放入灭菌托盘或吊篮，确保留有间隙（间距≥5cm），便于 EO 气体循环；

• 堆叠高度不超过灭菌柜有效容积的 80%，避免阻挡气体流通；

• 禁止将不同批次、不同灭菌参数要求的物品混装。

2. 灭菌柜及环境检查

• 设备检查：确认灭菌柜（真空型为主）的压力表、温度传感器、计时器等仪表校准合格（有效期内），真空泵、EO 进气阀、排气阀等部件功能正常，无泄漏。

• 安全准备：

• 检查灭菌柜的防爆装置、EO 浓度监测仪（报警阈值≤300ppm）及通风系统（确保泄漏气体可及时排出）；

• 操作人员穿戴防护装备（防毒面具、丁腈手套、防护服），避免直接接触 EO（刺激性气体，可能致癌）。

3. 生物指示剂准备

• 每批次灭菌需放置生物指示剂（如枯草杆菌黑色变种孢子片），作为灭菌效果的验证标准（EO 对该菌的杀灭效果可代表对其他微生物的灭活能力）。

• 将指示剂分别放置在灭菌柜的难灭菌位置（如中心区域、物品堆叠密集处）。

二、灭菌核心流程（以真空式灭菌柜为例）

1. 预热与真空阶段

• 预热：关闭灭菌柜门，启动预热程序，将柜内温度升至设定值（通常 37-55℃，根据物品耐热性调整，如塑料类物品宜 37-40℃），同时控制相对湿度在 40%-80%（湿度不足会降低 EO 灭菌效率）。

• 真空：启动真空泵，将柜内压力抽至 - 0.08 至 - 0.09MPa（绝对压力约 10-20kPa），目的是：

• 去除柜内空气和物品表面的水分、气体，避免空气与 EO 混合形成爆炸性气体（EO 爆炸极限为 3%-100%）；

• 利于 EO 气体深入物品内部。

2. 环氧乙烷注入阶段

• 按灭菌柜容积和物品装载量，计算 EO 用量（通常浓度为 450-1200mg/L），通过专用管道将液态 EO（或 EO 与二氧化碳的混合气体，更安全）注入柜内，确保气体均匀分布。

• 注入后保持柜内温度、湿度稳定，关闭进气阀，进入灭菌阶段。

3. 灭菌阶段（暴露时间）

• 根据物品类型和微生物污染程度，设定灭菌时间（通常 6-12 小时），期间实时监测柜内温度、压力、EO 浓度，确保参数稳定（偏差≤±2℃、±5% 压力）。

• 灭菌原理：EO 分子穿透微生物细胞膜，与蛋白质的氨基、羟基等发生烷基化反应，破坏微生物的代谢和繁殖能力，终杀灭细菌、病毒、真菌及芽孢。

4. 排气与解析阶段

• 排气：灭菌结束后，开启排气阀，将柜内残留 EO 气体排出至废气处理系统（如燃烧销毁或化学中和，避免直接排放污染环境），同时多次抽真空和通入洁净空气，降低柜内 EO 浓度至安全范围（≤100ppm）。

• 卸柜：打开灭菌柜门，取出灭菌物品，转移至解析室进行残留 EO 去除（解析阶段）。

三、解析（去残留）阶段

EO 具有毒性（对人体呼吸系统、皮肤有刺激，且可能致畸、致癌），需通过解析去除物品中残留的 EO，使其符合安全标准（通常要求残留量≤10μg/g，参考 GB 19082-2009 等标准）。

• 自然解析：将灭菌物品置于通风良好的解析室（温度 20-30℃，相对湿度≤60%），放置 7-14 天，通过自然挥发去除残留 EO（适用于普通医疗用品）。

• 强制解析：对急需使用的物品，采用高温解析（30-50℃）或真空解析，加速 EO 挥发，解析时间可缩短至 24-48 小时（需验证残留量达标）。

四、灭菌效果验证与记录

1. 生物指示剂培养

• 取出灭菌后的生物指示剂，在 37-40℃条件下培养 48-72 小时，若指示剂无菌生长（阴性），说明灭菌合格；若有菌生长（阳性），需重新灭菌并排查原因（如参数异常、装载不当）。

2. 物理化学监测

• 检查灭菌过程记录（温度、压力、时间、EO 浓度曲线），确认所有参数符合设定要求；

• 观察物品包装上的化学指示卡（如颜色变化），验证 EO 已充分接触物品。

3. 残留量检测

• 随机抽取解析后的物品，通过气相色谱法检测 EO 残留量，确保≤10μg/g；

• 对解析室环境空气进行 EO 浓度监测，确保≤1ppm（8 小时加权平均允许浓度）。

4. 记录存档

• 完整记录每批次灭菌的参数、生物指示剂结果、残留量检测报告等，存档至少 3 年（符合医疗器械追溯要求）。

五、安全注意事项

1. EO 属于易燃易爆气体，需单独存储在防爆柜中，远离火源、热源（储存温度≤30℃）；

2. 灭菌车间需设置紧急停车装置、洗眼器和淋浴设备，操作人员需定期进行健康体检（监测血液、呼吸系统指标）；

3. 废气处理需达标（如通过催化燃烧将 EO 转化为二氧化碳和水），避免环境污染。

环氧乙烷灭菌的核心是 “精准控制参数 + 严格安全管理”，其优势在于可杀灭所有微生物（包括芽孢），且对不耐高温、高压的物品（如非织造布、塑料器械）损伤小，因此成为医疗用品灭菌的主流方式之一。